《药物流行病学杂志》
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 主要试剂
1.1.2 主要仪器
1.2 方法
1.2.1 血样采集
1.2.2 显微镜观察
1.2.3 DNA提取
1.2.4 PCR检测
1.2.5 M.wenyonii SSU rRNA基因序列分析
2 结果
2.1 显微镜下观察结果
2.2 PCR检测结果
2.3 M.wenyonii SSU rRNA基因序列分析
3 讨论
文章摘要:温氏支原体是引起牛嗜血支原体病的主要病原之一,对新疆阿克苏地区某奶牛场牛温氏支原体的感染状况进行了检测调查。选择临床健康的1岁~2岁奶牛12头进行血液样本采集,经血液涂片染色,在显微镜下观察红细胞是否出现形态变化;同时提取血液样本全基因组DNA,通过PCR方法检测温氏支原体的核酸并进行序列分析,鉴别检测梨形虫和无浆体核酸。结果发现,12份血液涂片样本经显微镜观察,有1份样本中的红细胞呈明显星芒状,疑似支原体或其他病原体感染;分别基于牛温氏支原体、梨形虫和无浆体SSU rRNA基因的PCR检测结果显示,有3份血液样本呈现牛温氏支原体核酸阳性(含显微镜观察红细胞异常的1份样本),PCR产物序列分析发现,均与温氏支原体分离株序列(FJ375309)同源性为100%;梨形虫和无浆体均为阴性;系统发育分析显示,所获序列与温氏支原体同处一个进化支上,与其他常见嗜血支原体种类处于不同分支上。通过对红细胞形态变化的观察、牛温氏支原体的PCR检测和序列分析,证实该牛场存在牛温氏支原体的感染。研究结果为新疆地区牛嗜血支原体病的流行病学调查、防控提供了基础材料。
文章关键词:
论文DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2021.11.027
论文分类号:S858.23
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