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摘要

Abstract

英文缩略语

第一部分 :应用两种方法将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为神经元的研究

1 前言

2 实验材料与方法

    2.1 实验材料主要试剂

        2.1.1 主要试剂

        2.1.2 主要仪器

    2.2 实验方法

        2.2.1 贴壁法培养

        2.2.2 拟胚体法培养

        2.2.3 免疫荧光法检测神经前体细胞特异性抗原

        2.2.4 细胞电生理检测神经元特异性电活动

    2.3 统计学处理

3 结果

    3.1 拟胚体法体外培养mESCs

        3.1.1 mESCs的扩增

        3.1.2 拟胚体阶段

        3.1.3 神经前体细胞形成阶段

        3.1.4 免疫荧光验证神经前体细胞

        3.1.5 神经前体细胞的增殖

        3.1.6 神经前体细胞分化为神经元

    3.2 贴壁法体外培养mESCs

        3.2.1 mESCs的扩增

        3.2.2 神经前体细胞形成阶段

        3.2.3 神经元细胞形成阶段

        3.2.4 免疫荧光验证神经元细胞

    3.3 细胞电生理功能试验

4 讨论

5 结论

第二部分 :甲状腺激素在大脑皮层早期发育中的作用机制

1 前言

2 材料与方法

    2.1 主要试剂与仪器

        2.1.1 主要试剂

        2.1.2 主要仪器

    2.2 实验方法

        2.2.1 mESCs诱导及分化

        2.2.2 实时定量RT-PCR分析

        2.2.3 离子交换树脂去除血清中甲状腺激素

        2.2.4 甲状腺激素对胚胎干细胞分化诱导的条件优化

3 结果

    3.1 甲状腺激素对胚胎干细胞向神经前体分化阶段的影响

    3.2 甲状腺激素对神经前体细胞增殖期的影响

    3.3 甲状腺激素对神经前体细胞向神经元分化阶段的影响

        3.3.1 甲状腺激素对神经前体细胞向神经元分化阶段影响的表型

        3.3.2 甲状腺激素对神经前体细胞向神经元分化阶段影响的相关因子mRNA的表达

        3.3.3 甲状腺激素在神经发育晚期调控靶基因Tbr1 的表达

4 讨论

5 结论

第三部分 :COUP-TF1 调控甲状腺激素核受体α1 介导的基因转录及其对大脑皮层发育影响的机制研究

1 前言

2 材料与方法

    2.1 主要试剂与仪器

        2.1.1 主要试剂

        2.1.2 主要仪器

    2.2 实验方法

        2.2.1 利用慢病毒转染技术获得COUP-TF1 基因敲除的C57BL/6NES细胞系

        2.2.2 实时定量RT-PCR分析

        2.2.3 细胞免疫荧光

3 结果

    3.1 甲状腺激素核受体与COUP-TF1 核受体在神经发育中的表达

    3.2 shRNA-COUP-TF1 敲除后促进不成熟神经元的分化

    3.3 甲状腺激素对shRNA-COUP-TF1 敲除的胚胎干细胞分化而来的神经前体细胞向神经元分化的影响

    3.4 甲状腺激素对shRNA-COUP-TF1 敲除的胚胎干细胞分化而来的神经前体细胞向神经元分化的相关因子mRNA的表达。

4 讨论

5 结论

第四部分 :COUP-TF1 在大脑皮层神经分化早期的作用机制研究

1 前言

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