文章目录

1 材料与方法

1.1 样品来源

1.2 菌株、细胞与试验动物

1.3 主要试剂与试剂盒

1.4 引物设计与合成

1.5 临床病料样品的处理

1.6 临床样品的PCR扩增

1.7 PRV流行情况分析

1.8 病毒分离与细胞病变观察

1.9 病毒含量测定

1.10 致病性试验

1.11 gE基因序列分析

    1.11.1 PCR扩增

    1.11.2 克隆载体的构建与鉴定

    1.11.3 遗传进化分析

2 结果与分析

2.1 临床样品的PCR扩增

2.2 不同地区PRV流行情况分析

2.3 不同年份PRV流行情况分析

2.4 病毒分离与细胞病变观察

2.5 病毒含量测定

2.6 致病性试验

2.7 gE基因序列分析

3 讨论

文章摘要:为了掌握豫西地区猪伪狂犬病病毒（PRV）的流行特征,采用PCR方法对2016—2020年采集自豫西地区的152份临床病料进行了PRV病原学检测,并对PCR阳性样品进行了病毒的分离鉴定与gE基因遗传变异分析。结果:152份临床病料样品中PRV野毒株阳性率为13.82%,不同区县中以嵩县（21.05%）和栾川县（20.0%）的阳性率较高,不同年份中以2017年（20.69%）和2018年（19.05%）的阳性率较高;8个分离毒株均能引起BHK-21细胞发生变圆变大、聚集拉网、脱落等典型细胞病变,其每毫升TCID₅₀介于10^-5.88至10^-6.77之间,8个分离毒株对兔均有致病性;8个分离毒株gE基因与GenBank中登录的PRV流行毒株gE基因核苷酸序列同源性在97.4%～100%之间,且与国内2012年以来流行的变异毒株亲缘关系较近,与Ea株、LA株、Min-A株亲缘关系次之,与Kaplan株、Becker株亲缘关系较远。说明豫西地区存在PRV野毒株散发性流行,以2017年和2018年流行较为严重;获得的8个分离株具有较高的病毒滴度,对兔为高致病性毒株,且为国内近年来流行的变异毒株。

文章关键词:豫西地区,猪伪狂犬病,分子流行病学调查,病毒分离鉴定,

论文作者:汪一平¹ 游一² 李天宇¹ 路海君¹ 李海利² 许保疆² 

作者单位:1. 河南省洛阳市嵩县动物卫生监督所 2. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所 

论文分类号: S858.28

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